附件1
腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑
注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則
本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。
本指導(dǎo)原則是對腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實和細(xì)化。
本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。
本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。
一、適用范圍
腦利鈉肽檢測試劑是指利用抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)方法對人血漿、全血中的腦利鈉肽（BNP）進(jìn)行體外定量檢測的試劑。
氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑是指利用抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)方法對人血漿、全血、血清中的氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）進(jìn)行體外定量檢測的試劑。
本指導(dǎo)原則適用于以酶標(biāo)記、（電）化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、（時間分辨）熒光標(biāo)記等標(biāo)記方法，以微孔板、管、磁顆粒、微珠和塑料珠等為載體的定量檢測BNP/ NT-proBNP的免疫分析試劑，不適用于以各類膠體金標(biāo)記的檢測試紙和以125I等放射性同位素標(biāo)記的各類放射免疫或免疫放射試劑。
根據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）、《體外診斷試劑注冊管理辦法修正案》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第30號）和《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號），腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑管理類別為Ⅱ類，分類編碼為6840。
二、注冊申報資料要求
（一）綜述資料
腦利鈉肽（BNP）是一種與心房鈉尿肽（ANP）功能類似的神經(jīng)激素類物質(zhì)，具有促尿排鈉并抵制交感神經(jīng)活性的作用，與心房鈉尿肽組織在學(xué)分布及氨基酸組成等方面卻存在著較大差異，故被作為另一種物質(zhì)，命名為BNP。
一系列研究發(fā)現(xiàn)：人體內(nèi)的 BNP 是由 BNP 氨基酸前體蛋白（proBNP）的 C 端裂解得到，而其N端則裂解形成僅有76個氨基酸的NT-proBNP即氨基末端腦利鈉肽前體。
BNP及NT-proBNP的基因差異很大，主要表現(xiàn)在兩者在體內(nèi)的清除途徑、半衰期等存在明顯的差異。
BNP及NT-proBNP在體內(nèi)主要通過肝腎清除。BNP的消除主要通過三種方式：一是與利鈉肽受體C在受體介導(dǎo)下相互結(jié)合后被清除；二是被中性肽鏈內(nèi)切酶切割而清除；三是通過被動排泄被體內(nèi)的腎臟排泄清除。而相對于BNP來說NT-proBNP 在體內(nèi)并無上述前兩種主動清除機(jī)制，僅能被限制在高血流量的器官內(nèi)，通過腎小球濾過的形式被動清除，因此在體內(nèi)存留時間更長，更易于檢測。
BNP及NT-proBNP 生物活性也不同。BNP 因具有一個特征性的氨基酸環(huán)，具有重要的生物活性，但在體內(nèi)的半衰期較短，僅有18—22分鐘；而 NT-proBNP 為直線形結(jié)構(gòu)，無生物活性，在體內(nèi)半衰期較長，約120分鐘，且存在量不受體位及日常活動等因素的影響，含量穩(wěn)定。
由于BNP和NT-proBNP 主要是由左心室心肌細(xì)胞合成，在體內(nèi)等摩爾數(shù)產(chǎn)生后分泌進(jìn)入血液，兩者都可以作為一種有效的心衰標(biāo)志物，可單獨地預(yù)示心室壓力增高狀況，對于充血性心力衰竭及其引發(fā)的呼吸困難并發(fā)癥，原發(fā)性高血壓及其評價左心室功能障礙等心血管相關(guān)疾病的輔助診斷及治療評估監(jiān)測具有重要價值。
綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說明、產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、檢出限、線性范圍、準(zhǔn)確度、參考區(qū)間及臨床適用范圍等方面寫明擬申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。綜述資料作為注冊申報資料的重要組分之一，其內(nèi)容應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的相關(guān)要求。
申請人提交的材料應(yīng)至少包含以下幾方面內(nèi)容：
2.腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測所適用的疾病情況、腦利鈉肽與心功能分級的相關(guān)情況。
（二）主要原材料研究資料（如需要提供）
應(yīng)提供主要原材料如抗體、標(biāo)記物、固相載體、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品（如適用）等的選擇、制備及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等的研究資料。如主要原材料為企業(yè)自己生產(chǎn)，其生產(chǎn)工藝應(yīng)穩(wěn)定；如主要原材料源于外購，應(yīng)提供的資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及篩選試驗資料、供貨方提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、出廠檢驗報告，以及該原材料到貨后的質(zhì)量檢驗資料。
主要原材料的研究資料具體要求如下：
1. 腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑主要原材料的研究資料應(yīng)包括以下內(nèi)容。
NT-proBNP單克隆抗體的分析研究應(yīng)包括：抗體純度、抗體特異性等內(nèi)容。
BNP單克隆抗體的分析研究應(yīng)包括：抗體純度、抗體特異性等內(nèi)容。且由于BNP分子量約3.5kDa，蛋白分子較小，是半抗原，沒有免疫原性，不能直接免疫小鼠制備抗體，在制備該抗體時應(yīng)充分考慮以上問題。
2.校準(zhǔn)品和質(zhì)控品（如有）的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料，校準(zhǔn)品的溯源性文件。
3.申請人應(yīng)根據(jù)GB/T 21415—2008/ISO 17511:2003《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》提供所用校準(zhǔn)品的來源、賦值過程和相應(yīng)指標(biāo)、以及不確定度等內(nèi)容。明確校準(zhǔn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并提供校準(zhǔn)品的溯源性文件。
（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需要提供）
應(yīng)包括以下內(nèi)容（以下內(nèi)容可根據(jù)具體的方法學(xué)特點進(jìn)行編寫）：
1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可以流程圖方式表示，并標(biāo)明關(guān)鍵工藝質(zhì)控步驟，簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。
（四）分析性能評估資料
申請人應(yīng)提交產(chǎn)品研制階段對試劑進(jìn)行的所有性能驗證的研究資料，對于每項分析性能的評價都應(yīng)包括具體研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。有關(guān)分析性能驗證的背景信息也應(yīng)在申報資料中有所體現(xiàn)，包括實驗地點、適用儀器、試劑規(guī)格、批號、樣本來源等。建議選擇多批產(chǎn)品對以下分析性能進(jìn)行研究，性能評估時應(yīng)將試劑和所選用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品作為一個整體進(jìn)行評價，評估整個系統(tǒng)的性能是否符合要求。具體研究方法建議參照相關(guān)國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件進(jìn)行。
檢出限的確定方法可參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件，申請人應(yīng)提供空白限的確定方法。
檢出限驗證方法：
對5份濃度近似空白限（LOD）的低值樣本進(jìn)行檢測，每份樣本檢測5次，對檢測結(jié)果按照大小進(jìn)行排序，符合如下條件，即可認(rèn)為所提供的空白限和檢出限的設(shè)置基本合理。
1.1低于所提供的空白限數(shù)值的檢測結(jié)果的數(shù)量應(yīng)小于等于3個；
1.2適用時，無高于所提供的參考區(qū)間下限的檢測結(jié)果。
2.準(zhǔn)確度
對測量準(zhǔn)確度的評價方法依次包括：相對偏差、比對試驗、回收試驗等方法，因該項目目前尚無相應(yīng)的國家（國際）標(biāo)準(zhǔn)品，建議申請人優(yōu)先采用回收試驗的方法，申請人也可根據(jù)實際情況選擇其他合理方法進(jìn)行研究。
2.1相對偏差
2.1.1用可用于評價常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)（CRM）或其他公認(rèn)的參考物質(zhì)作為樣本進(jìn)行檢測，根據(jù)申請人提供的試劑盒線性區(qū)間，將能用于評價常規(guī)方法的參考物質(zhì)作為樣本，合理設(shè)置2—3個濃度，按照待測試劑盒說明書的步驟進(jìn)行檢測，每個樣本重復(fù)測定3次，測試結(jié)果記為（Xi），按公式（1）分別計算相對偏差（Bi），如果3次結(jié)果都符合要求，即判為合格。如果大于等于2次的結(jié)果不符合，即判為不合格。如果有1次結(jié)果不符合要求，則應(yīng)重新連續(xù)測試20次，并分別按照公式（1）計算相對偏差，如果大于等于19次測試的結(jié)果符合的要求，即判為合格。
……………………（1）
式中：
Bi—相對偏差；
Xi—測量濃度；
T—標(biāo)定濃度。
2.1.2企業(yè)參考品測試
由申請人提供企業(yè)參考品，按照常規(guī)樣本進(jìn)行檢測，每份樣本測定3次，測試結(jié)果記為（Xi），按公式（1）分別計算相對偏差（Bi）。
2.2比對試驗
取不少于40個合理分布在線性區(qū)間內(nèi)不同濃度的人體樣本，與指定的分析系統(tǒng)進(jìn)行比對試驗。每個樣本按待測試劑盒及選定分析系統(tǒng)的要求分別進(jìn)行檢測，每個樣本測定1遍，用線性回歸方法對兩組結(jié)果進(jìn)行線性擬合，得到線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)（r）和斜率。計算各個樣本的待測試劑盒測定值與對照系統(tǒng)測定值的絕對偏差或相對偏差。
注：如樣本不穩(wěn)定，一份樣本宜在兩個系統(tǒng)同時進(jìn)行檢測。
2.3回收實驗
選擇合適濃度的常規(guī)檢測樣本，分為體積相同的3—4份。在其中2—3份樣本中加入不同濃度相同體積的待測物標(biāo)準(zhǔn)液或純品制備待回收分析樣本，加入體積小于原體積的10%，制成2—3個不同加入濃度的待回收分析樣本，計算加入的待測物的濃度。在另一份樣本中加入同樣體積的無待測物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。用待評價系統(tǒng)分別重復(fù)測定待回收分析樣本和基礎(chǔ)樣本3次，計算回收率。
2.3.1加入濃度n=標(biāo)準(zhǔn)液濃度n×[標(biāo)準(zhǔn)液加入體積/（樣本體積+標(biāo)準(zhǔn)液體積）]
2.3.2計算回收率：
回收率n = 
2.3.3計算平均回收率：
平均回收率 =
2.3.4計算每個樣本回收率與平均回收率的差值：
每個樣本回收率與平均回收率的差值＝回收率n－平均回收率
如差值超過±10%，應(yīng)查找原因并糾正，重新進(jìn)行評估。
2.3.5計算比例系統(tǒng)誤差：
比例系統(tǒng)誤差 = |100%－平均回收率|
2.3.6結(jié)果評估：
結(jié)果應(yīng)滿足預(yù)期值，同時滿足臨床需求。
2.3.7回收試驗注意事項：
2.3.7.1加入的待測物標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的10%以內(nèi)，如果高濃度的待測物標(biāo)準(zhǔn)液不易得到， 加入體積亦不得超過原樣本體積的20%。
加入的待測物標(biāo)準(zhǔn)液體積量不應(yīng)影響樣本基質(zhì)；并且保證在加樣過程中的取樣準(zhǔn)確度。
2.3.7.2加入的溶劑應(yīng)不影響對待測物的測定。
2.3.7.3保證總濃度在系統(tǒng)分析測量范圍內(nèi)，盡量使加入標(biāo)準(zhǔn)液后樣本中的被測物濃度達(dá)到醫(yī)學(xué)決定水平。
2.3.7.4因待測物標(biāo)準(zhǔn)液溶液加入體積不到10%，為保證得到不同濃度的待回收分析樣本，標(biāo)準(zhǔn)液的濃度應(yīng)該足夠高。
3.線性范圍
線性范圍的建立方法可參考國際國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件進(jìn)行，建立方法簡述如下：
建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合樣本，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。建立一種定量測定方法的線性范圍時，需在預(yù)期測定范圍內(nèi)選擇7—11個濃度水平，每個濃度水平重復(fù)測定2—4次。如申請人希望有更多的測量點（比預(yù)期的線性范圍寬20%—30%），這樣能檢測到“拐點”，然后依據(jù)實驗結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，可發(fā)現(xiàn)最寬的線性范圍。
驗證線性范圍時可選擇5—7個濃度水平，將接近線性區(qū)間上限的高值樣本按一定比例稀釋為至少5個濃度，其中低值濃度的樣本須接近線性區(qū)間的下限。對每一濃度的樣本至少重復(fù)測定2次，計算其平均值，將測定濃度的平均值與理論濃度或稀釋比例用最小二乘法進(jìn)行直線擬合，并計算線性相關(guān)系數(shù)r。
4.精密度
精密度的評價方法可根據(jù)不同產(chǎn)品特征或申請人的研究習(xí)慣進(jìn)行，但必須保證研究的科學(xué)合理性，具體實驗方法可以參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件進(jìn)行。申請人應(yīng)對每項精密度指標(biāo)的評價標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)的范圍等。
針對本類產(chǎn)品的精密度評價主要包括以下要求：
4.1質(zhì)控品的選?。壕芏鹊脑u估應(yīng)使用2—3個濃度水平的質(zhì)控品進(jìn)行測定，質(zhì)控品濃度包括醫(yī)學(xué)決定水平（Cut-off值）附近的濃度值和中高濃度值。
4.2批內(nèi)不精密度：用同一批號試劑盒，對不同濃度的質(zhì)控品分別重復(fù)測定10次，計算10次測定結(jié)果的平均值（
）和標(biāo)準(zhǔn)差（S），根據(jù)公式（2）得出變異系數(shù)（CV）。
CV=S/×100% ……………………（2）
式中：
CV—變異系數(shù)；
S—10次測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差；
— 10次測量結(jié)果的平均值。
批間不精密度：用三個不同批號試劑盒，對不同濃度的質(zhì)控品分別重復(fù)測定10次，計算每個濃度樣本30次測量結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（S），根據(jù)公式（3）得出變異系數(shù)（CV）。
CV=S/×100% ……………………（3）
式中：
CV—變異系數(shù)；
S—30次測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差；
— 30次測量結(jié)果的平均值。
注：可參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件相關(guān)要求選取適宜的方法進(jìn)行試驗。
5.分析特異性
5.1交叉反應(yīng)
易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的其他抗原、抗體等的驗證情況，應(yīng)至少包括結(jié)構(gòu)類似物ANP、CNP、血管緊張素、腎上腺素作為腦利鈉肽（BNP）/氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）檢測試劑交叉反應(yīng)驗證的物質(zhì)。交叉反應(yīng)驗證物質(zhì)的濃度分布應(yīng)覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度。
5.2干擾物質(zhì)
潛在的干擾物質(zhì)主要包括（以下結(jié)果應(yīng)量化表示，禁用輕度、嚴(yán)重的模糊表述）：
5.2.1內(nèi)源性干擾
應(yīng)明確已知干擾因素對測定結(jié)果的影響：可采用回收實驗（如適用）對不同濃度的血紅蛋白、膽紅素、甘油三酯、類風(fēng)濕因子、嗜異性抗體對檢測結(jié)果的影響進(jìn)行評價，干擾物濃度的分布應(yīng)覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度，待評價的BNP/NT-proBNP樣本濃度至少應(yīng)包含生理、病理2個水平，選取線性范圍內(nèi)有臨床代表性意義的濃度。
5.2.2樣本添加劑的干擾
如果試劑盒適用樣本類型包括血漿/全血樣本，應(yīng)對各種適用抗凝劑進(jìn)行檢測，如EDTA、枸櫞酸鈉、肝素等。方法為對腦利鈉肽（BNP）/氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）檢測試劑檢測陰性、弱陽性（臨界濃度）的臨床或模擬添加樣本分別進(jìn)行驗證，樣本量選擇應(yīng)體現(xiàn)一定的統(tǒng)計學(xué)意義，說明樣本的制備方法及干擾實驗的評價標(biāo)準(zhǔn)，確定可接受的干擾物質(zhì)極限濃度。
5.2.3處方及非處方藥的干擾
所選取的藥物可包含治療心衰的常用藥，如：利尿劑、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（ACEI）/血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑（ARB）、β受體阻滯劑、醛固酮受體拮抗劑和血管緊張素受體腦啡肽酶抑制劑（ARNi）。藥物干擾的研究可根據(jù)需要由申請人選擇何種藥物進(jìn)行研究，藥物濃度應(yīng)結(jié)合臨床實際用藥情況。
6.校準(zhǔn)品及質(zhì)控品（如適用）
參照GB/T 21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品的溯源、賦值過程以及測量不確定度相關(guān)資料，提供質(zhì)控品賦值及其靶值范圍確定的相關(guān)資料。同時，應(yīng)對校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的賦值結(jié)果的瓶內(nèi)均勻性、瓶間均勻性以及其賦值結(jié)果的準(zhǔn)確度進(jìn)行評價。如校準(zhǔn)品或質(zhì)控品的基質(zhì)不同于臨床常用樣本類型，還應(yīng)提交基質(zhì)效應(yīng)的相關(guān)研究資料。
7.鉤狀（Hook）效應(yīng)（如適用）：說明不會產(chǎn)生Hook效應(yīng)的濃度上限或相關(guān)研究，如需稀釋，應(yīng)注明對稀釋液的要求、最佳或最大稀釋比例。每個濃度重復(fù)3份，對鉤狀效應(yīng)進(jìn)行合理的驗證。建議在產(chǎn)品說明書上明示對鉤狀效應(yīng)的研究結(jié)果。
8.其他需注意問題
對于適用多個機(jī)型的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書【適用儀器】項中所列的所有型號儀器的性能評估資料。如產(chǎn)品涉及不同包裝規(guī)格，則需要提供每個包裝規(guī)格在不同型號儀器上的評估資料；如不同的包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，需要提交采用每個包裝規(guī)格產(chǎn)品進(jìn)行的上述項目評估的試驗資料及總結(jié)。如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細(xì)說明，具體說明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。
試劑盒的測試樣本類型如包括血清和血漿樣本，則應(yīng)對二者進(jìn)行相關(guān)性研究以確認(rèn)二者檢測結(jié)果是否完全一致或存在某種相關(guān)性（如系數(shù)關(guān)系）。試劑盒的測試樣本類型如包括血漿和全血樣本，則應(yīng)對二者進(jìn)行相關(guān)性研究以確認(rèn)二者檢測結(jié)果是否完全一致或存在某種相關(guān)性（如系數(shù)關(guān)系）。
（五）參考區(qū)間確定資料
應(yīng)提交建立參考區(qū)間所采用樣本來源及詳細(xì)的試驗資料。應(yīng)明確參考人群的篩選標(biāo)準(zhǔn)，研究各組（如性別、年齡等）例數(shù)應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。建議參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品參考區(qū)間確定的文件。
若引用BNP/NT-proBNP臨床應(yīng)用的專家共識或其他針對中國人群參考區(qū)間研究的相關(guān)文獻(xiàn)，應(yīng)明確說明出處，并進(jìn)行驗證。驗證樣本應(yīng)不少于120例，樣本來源應(yīng)至少考慮不同年齡、性別因素，盡可能考慮樣本來源的多樣性、代表性。研究結(jié)果應(yīng)在說明書【參考區(qū)間】項中進(jìn)行相應(yīng)說明。
BNP在人體內(nèi)的半衰期為22分鐘，體外室溫下穩(wěn)定性為2—8小時，而NT-proBNP在人體內(nèi)的半衰期為120分鐘，體外室溫下穩(wěn)定性為大于72小時。在研究過程中應(yīng)根據(jù)以上兩種物質(zhì)特點，對分析前應(yīng)考慮的兩個因素予以考慮，即生物學(xué)因素和方法學(xué)因素。生物學(xué)因素包括代謝和血液動力學(xué)，方法學(xué)因素包括樣本收集和處置等。
（六）穩(wěn)定性研究資料
穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。
試劑的穩(wěn)定性主要包括實時穩(wěn)定性研究，以及試劑開瓶穩(wěn)定性（如適用）、復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）、運輸穩(wěn)定性及凍融次數(shù)限制（如適用）等研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。
適用樣本的穩(wěn)定性主要包括室溫（10—30℃）保存、冷藏（2—8℃）和冷凍（－20℃）條件下的有效性驗證，可以在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度點（溫度范圍），每間隔一定的時間段對儲存樣本進(jìn)行穩(wěn)定性驗證，從而確認(rèn)不同類型樣本的保存穩(wěn)定性。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進(jìn)行評價。
由于各企業(yè)的原料選擇、工藝過程的不同，BNP在體外室溫穩(wěn)定性也不盡相同，應(yīng)提交相關(guān)研究資料。
試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中分別進(jìn)行詳細(xì)說明。
（七）臨床評價資料
此項目已經(jīng)列入《關(guān)于新修訂免于進(jìn)行臨床試驗醫(yī)療器械目錄的通告》（國家藥品監(jiān)督管理局通告2018年第94號）中免于進(jìn)行臨床試驗的體外診斷試劑目錄。根據(jù)體外診斷試劑臨床評價的相關(guān)要求，申請人可按照《免于進(jìn)行臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價資料基本要求（試行）》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2017年第179號）要求進(jìn)行臨床評價。如無法按要求進(jìn)行臨床評價，應(yīng)進(jìn)行臨床試驗。
1.臨床評價途徑
臨床評價的開展、臨床評估方案的制定以及臨床評價報告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《免于進(jìn)行臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價資料基本要求（試行）》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2017年第179號）的要求。下面僅對臨床評價中的基本問題進(jìn)行闡述。
1.1臨床評價途徑的選擇
申請人應(yīng)當(dāng)根據(jù)申報產(chǎn)品的具體情況建立適應(yīng)的評價方法，充分考慮產(chǎn)品的預(yù)期用途，開展具有針對性的評價研究，可以選擇以下兩種評價途徑之一。
1.1.1與境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行比較研究試驗，證明兩者具有等效性。應(yīng)選擇目前臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的產(chǎn)品作為對比試劑，同時應(yīng)充分了解對比試劑的技術(shù)信息，包括方法學(xué)、臨床預(yù)期用途、主要性能指標(biāo)、校準(zhǔn)品的溯源情況、推薦的參考區(qū)間等。應(yīng)盡量選擇方法學(xué)相同，線性范圍、精密度、參考區(qū)間等性能接近的同類產(chǎn)品作為對比試劑，如方法學(xué)不同，則應(yīng)首選方法學(xué)性能較高的對比試劑進(jìn)行試驗。應(yīng)提供已上市產(chǎn)品的境內(nèi)注冊信息及說明書。
1.1.2與參考方法進(jìn)行比較研究試驗，考察待評價試劑與參考方法的符合率/一致性。
1.2檢測地點的選擇及要求
1.2.1申請人可根據(jù)產(chǎn)品特點自行選擇試驗地點完成樣本檢測，檢測地點的設(shè)施、試驗設(shè)備、環(huán)境等應(yīng)能夠滿足產(chǎn)品檢測要求。
1.2.2如選擇與參考方法進(jìn)行比較研究試驗，應(yīng)選擇參考實驗室進(jìn)行研究，參考實驗室應(yīng)具有中國合格評定國家認(rèn)可委員會（CNAS）認(rèn)可的相關(guān)檢測資質(zhì)。
1.3臨床評估方案
申請人應(yīng)在試驗前，從流行病學(xué)、統(tǒng)計學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計科學(xué)合理的臨床評估方案并遵照執(zhí)行。
如選擇與境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行比較研究試驗途徑，試驗方案中還應(yīng)明確兩種試劑檢測結(jié)果不一致的判定依據(jù)，以及結(jié)果不一致樣本復(fù)核的方法。
1.4試驗方法
試驗方法的建立可參考相關(guān)方法學(xué)比對的指導(dǎo)原則（如：《體外診斷試劑分析性能評估（準(zhǔn)確度-方法學(xué)比對）技術(shù)審查指導(dǎo)原則》），并重點關(guān)注以下內(nèi)容：
1.4.1樣本要求
1.4.1.1選擇涵蓋預(yù)期用途和干擾因素的樣本進(jìn)行評價研究，充分考慮試驗人群選擇、疾病選擇等內(nèi)容，應(yīng)考慮到年齡、性別的差異，盡量覆蓋各類適用人群。樣本應(yīng)能夠充分評價產(chǎn)品臨床使用的安全性、有效性。
1.4.1.2樣本含量應(yīng)采用合理的統(tǒng)計學(xué)方法進(jìn)行計算，應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。樣本濃度應(yīng)覆蓋待評價試劑檢測范圍，盡可能均勻分布。
可選擇總樣本量不少于40例并分別采用待評價試劑和對比試劑/參考方法進(jìn)行雙份測定的方式，其中參考區(qū)間以外樣本應(yīng)不少于50%，亦可選擇總樣本量不少于100例并分別采用待評價試劑和對比試劑/參考方法進(jìn)行單次測定的方式。樣本的測定值應(yīng)在測量范圍內(nèi)。
試驗前應(yīng)設(shè)定臨床評價性能指標(biāo)的可接受標(biāo)準(zhǔn)，如果比較研究試驗結(jié)果無法達(dá)到預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)適當(dāng)擴(kuò)大樣本量進(jìn)行評價。
1.4.1.3應(yīng)注重醫(yī)學(xué)決定水平量值附近樣本的選擇，并涵蓋檢測范圍。因腦利鈉肽（BNP）/氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）檢測試劑產(chǎn)品受年齡、性別等多生理學(xué)因素的影響，建議進(jìn)行分層統(tǒng)計，申請人應(yīng)結(jié)合實際情況選擇適當(dāng)?shù)臉颖玖窟M(jìn)行充分的臨床評價。
1.4.1.4應(yīng)明確臨床樣本的采集要求。
應(yīng)明確抗凝劑的要求、存貯條件、可否凍融、干擾物質(zhì)的影響等要求及避免使用的樣本。試驗中，盡可能使用新鮮樣本，避免貯存。如無法避免使用貯存樣本時，注明貯存條件及時間，在數(shù)據(jù)分析時應(yīng)考慮其影響。
BNP檢測項目應(yīng)在其說明書聲稱的檢測時間內(nèi)完成檢測。
1.4.1.5評價用的樣本類型應(yīng)與注冊申請保持一致。對于具有可比性的不同樣本類型，如血清和血漿樣本，血漿和全血樣本可在分析性能評估中對樣本適用性進(jìn)行研究，或在臨床評價中對每種樣本類型分別進(jìn)行符合統(tǒng)計學(xué)意義數(shù)量的評估。
1.4.2試驗要點
1.4.2.1在試驗操作的過程中應(yīng)采用盲法。待評價試劑和對比試劑/參考方法應(yīng)平行操作，整個試驗應(yīng)有內(nèi)部質(zhì)量控制。
1.4.2.2建議本產(chǎn)品試驗檢測周期至少5天，以客觀反映實際情況。
1.4.2.3擴(kuò)大樣本量和延長試驗時間將提高試驗的可靠性，申請人應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)臉颖玖窟M(jìn)行充分的臨床評價。
1.4.3數(shù)據(jù)收集和處理
1.4.3.1應(yīng)首先進(jìn)行離群值觀察，離群值的個數(shù)不得超過限值。若未超限，可刪除離群值后進(jìn)行分析；若超出限值，則需合理分析原因并考慮糾正措施，必要時重新收集樣本進(jìn)行分析。離群值分析和處理方法應(yīng)有依據(jù)。
申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點選擇合適的統(tǒng)計學(xué)方法，建議進(jìn)行相關(guān)性分析，給出相關(guān)系數(shù)，進(jìn)行回歸分析給出回歸方程和試驗數(shù)據(jù)的散點圖，并對相關(guān)系數(shù)和回歸方程的斜率進(jìn)行顯著性分析。結(jié)合試驗數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，選擇合理的統(tǒng)計學(xué)方法進(jìn)行分析，統(tǒng)計結(jié)果應(yīng)能證實待評價試劑相對于對比試劑/參考方法檢測結(jié)果無明顯偏差或偏差在允許誤差范圍內(nèi)。另外，在臨床評估方案中應(yīng)明確統(tǒng)計檢驗假設(shè)。
具體數(shù)據(jù)分析方法如下：
用回歸分析驗證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以y=a+bx和R2的形式給出回歸分析的擬合方程，其中：y是待評價試劑結(jié)果，x是對比試劑結(jié)果，b是方程斜率，a是y軸截距，R2是決定系數(shù)，同時應(yīng)給出b的95%（或99%）置信區(qū)間，定量值結(jié)果應(yīng)無統(tǒng)計學(xué)差異。
建議給出待評價試劑對比試劑之間的差值（偏差）及比值（偏差）散點圖。
如產(chǎn)品適用不同的具有可比性的樣本類型，如選擇在臨床評價中對每種樣本類型分別進(jìn)行評估，則考慮到對不同樣本類型的檢測結(jié)果可能存在一定差異，故建議對不同樣本類型分別進(jìn)行統(tǒng)計分析，以對待評價試劑的臨床性能進(jìn)行綜合分析。
1.5臨床評價報告
臨床評價報告應(yīng)對試驗設(shè)計、試驗實施情況和數(shù)據(jù)分析方法等進(jìn)行清晰的描述。應(yīng)至少包括如下內(nèi)容：
1.5.1基本信息，如產(chǎn)品名稱、申請人名稱及聯(lián)系方式、試驗時間及地點等。
1.5.2試驗設(shè)計，詳細(xì)說明對比試劑/方法選擇、樣本入組和排除標(biāo)準(zhǔn)、樣本量要求、設(shè)盲要求、統(tǒng)計分析方法的選擇等內(nèi)容。
1.5.3試驗實施情況，具體包括：
1.5.3.1樣本選擇情況，包括例數(shù)、樣本分布等。樣本含量應(yīng)詳細(xì)說明計算方法及依據(jù)。
1.5.3.2臨床評價所用產(chǎn)品信息，如評價用試劑、對比試劑/方法、配合使用的其他試劑/儀器的產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)企業(yè)、規(guī)格/型號、批號等。
1.5.3.3實驗過程描述。
1.5.3.4試驗管理，包括參加人員、質(zhì)量控制情況、數(shù)據(jù)管理、出現(xiàn)的問題及處理措施等。
1.5.3.5數(shù)據(jù)分析及評價結(jié)果總結(jié)，根據(jù)確定的統(tǒng)計方法對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，對產(chǎn)品的臨床性能進(jìn)行合理評價。
1.5.3.6評價數(shù)據(jù)表
應(yīng)以附件形式對入組的樣本情況進(jìn)行匯總描述，應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：可溯源樣本編號、樣本基本信息、樣本類型、評價用試劑和對比試劑/方法檢測結(jié)果、樣本臨床背景信息或臨床診斷信息（如適用）等。
1.5.3.7評價報告應(yīng)由申請人/代理人簽章。
1.6其他評價資料
除以上臨床評價報告外，對擬申報產(chǎn)品臨床性能進(jìn)行評價的相關(guān)文獻(xiàn)，可作為補(bǔ)充臨床評價資料提交。應(yīng)參照《醫(yī)療器械臨床評價技術(shù)指導(dǎo)原則》的文獻(xiàn)檢索要求進(jìn)行文獻(xiàn)的檢索、篩選和分析。
2.臨床試驗途徑
臨床試驗的開展、方案的制定以及報告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求。
（八）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料
主要參考YY/T0316—2016《醫(yī)療器械 風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》。風(fēng)險管理活動要貫穿產(chǎn)品設(shè)計、生產(chǎn)、上市后使用及產(chǎn)品處理的整個生命周期。要體現(xiàn)申請人風(fēng)險管理活動計劃的完整性，尤其上市管理的風(fēng)險分析與評價過程。對于上市前風(fēng)險管理中尚未認(rèn)知的風(fēng)險，應(yīng)在上市后開展信息收集，一旦發(fā)現(xiàn)異常及時進(jìn)行風(fēng)險評價，采取控制措施，更新風(fēng)險管理文件。
腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑風(fēng)險分析應(yīng)參考YY/T0316—2016行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)要求，逐一進(jìn)行回答，也可以用列表的方式列示。剩余風(fēng)險分析時，一定要確認(rèn)逐一采取風(fēng)險控制措施后，是否會引入或造成更大的風(fēng)險，只有新引入風(fēng)險能轉(zhuǎn)化為可接受風(fēng)險，方能認(rèn)為風(fēng)險受控。腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑必須進(jìn)行風(fēng)險與受益分析，受益大于風(fēng)險時方可接受。
提供腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑產(chǎn)品上市前風(fēng)險管理報告，此報告旨在說明并承諾：
—風(fēng)險管理計劃已被正確地實施。
—綜合剩余風(fēng)險是可接受的。
—已有恰當(dāng)方法獲得與申請人申報的腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑產(chǎn)品相關(guān)和出廠后流通與臨床應(yīng)用的信息。
應(yīng)隨風(fēng)險管理報告一并附上包括風(fēng)險分析、風(fēng)險評價、風(fēng)險控制概述管理資料。至少應(yīng)包括：
—產(chǎn)品安全特征清單。
—產(chǎn)品可預(yù)見危害及分析清單（說明危害、可預(yù)見事件序列、危害處境和可能發(fā)生的損害之間的關(guān)系）。
—風(fēng)險評價、風(fēng)險控制措施以及剩余風(fēng)險評價匯報表。
對于風(fēng)險分析和管理概述，應(yīng)包括一份風(fēng)險總結(jié)，以及如何將風(fēng)險控制在可接受程度的內(nèi)容。從預(yù)期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知和可預(yù)見的危害等方面，對產(chǎn)品進(jìn)行全面分析并闡述相應(yīng)的防范措施。
1.風(fēng)險分析方法
1.1在對風(fēng)險的判定及分析中，要考慮合理的可預(yù)見的情況，包括：正常使用條件下和非正常使用條件下。
1.2風(fēng)險判定及分析應(yīng)包括：對于患者的危害、對于操作者的危害和對于環(huán)境的危害。
1.3風(fēng)險形成的初始原因應(yīng)包括：人為因素，產(chǎn)品組成成分的危害，原材料危害，綜合危害，環(huán)境條件。
1.4風(fēng)險判定及分析考慮的問題包括：腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑原材料生物學(xué)危害；產(chǎn)品質(zhì)量是否會導(dǎo)致使用中出現(xiàn)不正常結(jié)果；操作信息，包括警示性語言、注意事項以及使用方法的準(zhǔn)確性；使用過程可能存在的危害等。
2.風(fēng)險分析清單
腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑產(chǎn)品的風(fēng)險管理報告應(yīng)符合YY/T 0316—2016的有關(guān)要求，審查要點包括：
2.1產(chǎn)品定量分析是否準(zhǔn)確（依據(jù)YY/T 0316—2016 附錄C）；
2.2危害分析是否全面（依據(jù)YY/T 0316—2016附錄H）；
2.3風(fēng)險可接收準(zhǔn)則，降低風(fēng)險的措施及采取措施后風(fēng)險的可接收程度，是否有新的風(fēng)險產(chǎn)生。
根據(jù)YY/T 0316—2016附錄H對該產(chǎn)品已知或可預(yù)見的風(fēng)險進(jìn)行判定，腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑產(chǎn)品在進(jìn)行風(fēng)險分析時至少應(yīng)包括對以下主要危害的風(fēng)險分析，申請人還應(yīng)根據(jù)自身產(chǎn)品特點確定其他危害。針對產(chǎn)品的各項風(fēng)險，申請人應(yīng)采取應(yīng)對措施，確保風(fēng)險降到可接受的程度。
表1 產(chǎn)品的主要危害（舉例）
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危害類型 |
可預(yù)見的事件及 事件序列 |
危害處境 |
產(chǎn)生的后果或損壞 |
采取的措施 |
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生物學(xué)危害 |
生物污染 |
產(chǎn)品中污染有病原微生物 |
微生物污染可引起產(chǎn)品的嚴(yán)重檢測錯誤、可能導(dǎo)致操作人員感染 |
對生產(chǎn)過程中的過濾、分裝等環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格控制，嚴(yán)格按照各工序標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作；對生物源材料病原微生物進(jìn)行控制 |
|
由于廢物和（或）醫(yī)療器械處置的污染 |
不正確的廢物處理 |
有可能造成污染環(huán)境 |
嚴(yán)格按照使用說明書中的規(guī)定進(jìn)行操作 |
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化學(xué)危害 |
毒性 |
皮膚直接接觸產(chǎn)品 |
導(dǎo)致操作人員中毒 |
嚴(yán)格按照各工序標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程及使用說明書中的規(guī)定進(jìn)行操作 |
|
降解 |
不正當(dāng)?shù)牟僮?/span> |
降解可導(dǎo)致產(chǎn)品檢測靈敏度降低 |
嚴(yán)格按照各工序標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作 |
|
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操作危害 |
不適當(dāng)?shù)臉?biāo)記 |
操作人員的錯誤操作 |
可引起檢測錯誤 |
嚴(yán)格按照使用說明書中的規(guī)定進(jìn)行操作 |
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不適當(dāng)?shù)牟僮髡f明 |
說明書的不精確描述 |
可引起檢測錯誤 |
嚴(yán)格按照使用說明書中的規(guī)定進(jìn)行操作 |
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由不熟練、未經(jīng)培訓(xùn)的人員使用 |
操作人員的錯誤操作 |
可引起檢測錯誤 |
嚴(yán)格按照使用說明書中的規(guī)定進(jìn)行操作 |
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錯誤或判斷錯誤 |
操作人員的錯誤操作 |
可引起檢測錯誤 |
嚴(yán)格按照使用說明書中的規(guī)定進(jìn)行操作 |
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使用者未使用試劑盒內(nèi)配備的樣本稀釋液和質(zhì)控品（如適用） |
樣本加樣過程操作不當(dāng)或質(zhì)控品使用差錯誤 |
可引起檢測錯誤 |
說明書中應(yīng)有詳細(xì)的樣本稀釋及加樣要求和質(zhì)控品的使用方法 |
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信息危害 |
失誤和認(rèn)知檢索錯誤 |
操作人員的錯誤操作 |
可引起檢測錯誤 |
嚴(yán)格按照使用說明書中的規(guī)定進(jìn)行操作 |
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疏忽和出錯 |
操作人員的錯誤操作 |
可引起檢測錯誤 |
嚴(yán)格按照使用說明書中的規(guī)定進(jìn)行操作 |
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違反或縮減說明書、程序等 |
操作人員的錯誤操作 |
可引起檢測錯誤 |
嚴(yán)格按照使用說明書中的規(guī)定進(jìn)行操作 |
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對醫(yī)療器械壽命中止缺少適當(dāng)?shù)臎Q定 |
說明書的不精確描述 |
可引起檢測錯誤 |
完善說明書中使用說明 |
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說明書中對試劑的使用條件沒有描述；適用的血漿樣本所采用的抗凝劑沒有明確要求 |
操作者未能在要求的環(huán)境下進(jìn)行正確的操作 |
可引起檢測錯誤 |
說明書中對產(chǎn)品適合的使用條件有描述；明確本試劑適合的抗凝劑種類 |
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功能性失效的危害 |
不適當(dāng)?shù)陌b |
操作人員的錯誤操作 |
造成產(chǎn)品降解、污染，使產(chǎn)品性能降低 |
嚴(yán)格按照使用說明書中的規(guī)定進(jìn)行操作 |
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產(chǎn)品標(biāo)識不恰當(dāng) |
產(chǎn)品標(biāo)識不恰當(dāng)，直接影響產(chǎn)品的運輸儲存和檢測結(jié)果 |
產(chǎn)品失效 |
在產(chǎn)品標(biāo)簽樣稿中，對產(chǎn)品標(biāo)識包括包裝盒（中包裝）標(biāo)識盒運輸貯存標(biāo)識做出詳細(xì)規(guī)定，各種標(biāo)識設(shè)置符合法規(guī)的規(guī)定，并隨著法規(guī)的更新及時進(jìn)行修改和完善 |
由于腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑的功能和結(jié)構(gòu)的差異，本章給出的風(fēng)險要素及其示例是常見的而不是全部的。上述部分只是風(fēng)險管理過程的組成部分，不是風(fēng)險管理的全部。申請人應(yīng)按照YY/T 0316—2016中規(guī)定的過程和方法，在產(chǎn)品整個生命周期內(nèi)建立、形成文件和保持一個持續(xù)的過程，用以判定與醫(yī)療器械有關(guān)的危害、估計和評價相關(guān)的風(fēng)險、控制這些風(fēng)險并監(jiān)視上述控制的有效性，以充分保證產(chǎn)品的安全和有效。
（九）產(chǎn)品技術(shù)要求
擬定產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》、《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2014年第44號）的相關(guān)規(guī)定。
申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)申請人產(chǎn)品研制、分析性能評估等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求。
腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑的產(chǎn)品性能指標(biāo)應(yīng)主要包括：外觀、溯源性、準(zhǔn)確度、檢出限、線性、重復(fù)性、批間差等。技術(shù)要求應(yīng)不低于YY/T 1451—2016《腦利鈉肽和氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑（盒）（定量標(biāo)記免疫分析法）》的要求。
（十）產(chǎn)品注冊檢驗報告
根據(jù)《體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式》要求，注冊檢驗報告及產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價意見應(yīng)由具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗機(jī)構(gòu)出具。
目前，腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑尚無適用的國家參考品/標(biāo)準(zhǔn)品，可采用企業(yè)參考品進(jìn)行注冊檢驗，但企業(yè)參考品的具體信息應(yīng)明確。如有適用的國家參考品/標(biāo)準(zhǔn)品發(fā)布，則申請人應(yīng)采用國家參考品/標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行注冊檢驗，并在產(chǎn)品技術(shù)要求中寫明相應(yīng)內(nèi)容。
（十一）產(chǎn)品說明書
說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、樣本采集及處理、檢驗方法、檢驗結(jié)果的解釋以及注意事項等重要信息，是指導(dǎo)實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求，境外產(chǎn)品的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨列明參考文獻(xiàn)的相關(guān)信息。
結(jié)合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，下面對腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑說明書的重點內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明，以指導(dǎo)申請人更合理地完成說明書編制。
1．【產(chǎn)品名稱】
1.1試劑盒名稱由三部分組成。被測物質(zhì)的名稱、用途、方法或者原理。被測物質(zhì)名稱應(yīng)根據(jù)相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)以及《全國臨床檢驗操作規(guī)程（第4版）》相應(yīng)物質(zhì)名稱編寫，檢驗的方法或者原理應(yīng)明確到細(xì)分的具體方法學(xué)，如：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）檢測試劑（磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法）。
2.【包裝規(guī)格】
如不同包裝規(guī)格有與之特定對應(yīng)的機(jī)型，應(yīng)同時明確適用機(jī)型。
3.【預(yù)期用途】應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：
3.1試劑盒用于定量檢測人×××樣本中的腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體。其中，×××應(yīng)寫明適用的樣本類型為血清、血漿還是全血，上述內(nèi)容均應(yīng)有相應(yīng)的分析性能評估資料和臨床評價資料支持。
3.2與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況，說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒炇以\斷方法等。
4.【檢驗原理】
應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要成分詳細(xì)說明檢驗原理、方法，必要時可采用圖示方法描述。
5.【主要組成成分】
5.1 說明試劑盒包含組成、數(shù)量、濃度或含量等信息。
5.2 建議對所包被抗體的相關(guān)信息進(jìn)行簡單介紹。
5.3 對于校準(zhǔn)品和質(zhì)控品（如適用）：
5.3.1注明校準(zhǔn)品的定值及其溯源性，溯源性資料應(yīng)寫明溯源的最高級別（應(yīng)包括標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或參考方法的發(fā)布單位及編號）。
5.3.2應(yīng)明確說明質(zhì)控品的生物學(xué)來源、活性及其他特性，應(yīng)明確靶值范圍（如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨的靶值單）。
5.4 應(yīng)明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換，如可互換，則需提供相應(yīng)的性能驗證資料。
5.5 對于非試劑組分，如試驗用耗材（封板膜、自封袋）、質(zhì)量控制證書、賦值表（靶值單）、校準(zhǔn)卡等，應(yīng)注明相關(guān)信息。
6.【儲存條件及有效期】
6.1對試劑的實時穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性（如適用）、復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）、凍融次數(shù)限制（如適用）等信息作詳細(xì)介紹。包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。
6.2不同組分保存條件及有效期不同時，應(yīng)分別說明，產(chǎn)品總有效期以其中效期最短的為準(zhǔn)。
注：保存條件不應(yīng)有模糊表述，如“常溫”“室溫”。
6.3生產(chǎn)日期、使用期限或失效日期（可見標(biāo)簽）。
7.【適用儀器】
7.1如適用儀器為酶標(biāo)儀則需給出對酶標(biāo)儀配置的要求。
7.2如適用儀器為非通用的儀器則需寫明具體適用儀器的型號，不能泛指某一系列儀器，并且與分析性能評估資料一致。
8.【樣本要求】重點明確以下內(nèi)容：
8.1樣本收集要求：樣本中的BNP在血液中各種酶的作用下較易分解，因此應(yīng)對樣本收集方式提出要求。
8.2血液樣本應(yīng)當(dāng)說明對采血管及抗凝劑的要求：明確樣本類型、采血管材質(zhì)和抗凝劑。有關(guān)描述均應(yīng)建立在相關(guān)性能評價及穩(wěn)定性研究的基礎(chǔ)上。
8.3樣本處理、運送及保存：對血液樣本離心條件的要求，冷藏/冷凍樣本檢測前是否需恢復(fù)至室溫，凍融次數(shù)的要求。
9.【檢驗方法】詳細(xì)說明試驗操作的各個步驟
9.1試驗環(huán)境：溫、濕度條件及樣本復(fù)溫等要求。
9.2試劑使用方法、注意事項，試劑開封后注意事項等。
9.3待測樣本的預(yù)處理方法、步驟及注意事項。
9.4明確樣本檢測的操作步驟。
9.5校準(zhǔn)：校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項、校準(zhǔn)曲線的繪制方法。對需專用儀器的產(chǎn)品，應(yīng)注明推薦的儀器校準(zhǔn)周期。
9.6質(zhì)量控制：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等。
9.7結(jié)果計算：對于手工/半自動儀器，說明校準(zhǔn)曲線擬合方式及結(jié)果計算方法。
10.【參考區(qū)間】
應(yīng)按照不同性別、年齡，分別說明常用樣本類型的參考區(qū)間，并簡要說明參考區(qū)間的確定方法。建議注明“由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間”。
11.【檢驗結(jié)果的解釋】
結(jié)合質(zhì)控品對所有可能出現(xiàn)的結(jié)果進(jìn)行合理的解釋。本試劑的檢測結(jié)果僅供臨床參考，不能單獨作為確診或排除病例的依據(jù)，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。明確有可能存在的數(shù)值升高因素及數(shù)值降低因素，明確說明對何種條件下需要進(jìn)行確認(rèn)試驗，以及在確認(rèn)試驗時對待測樣本可能采取的優(yōu)化條件等進(jìn)行詳述。
如樣本濃度超出線性范圍后，應(yīng)明確最大可稀釋倍數(shù)及稀釋液種類，并提供相應(yīng)的支持性研究資料。
12.【檢驗方法局限性】至少應(yīng)包括以下內(nèi)容：
12.1本試劑的檢測結(jié)果僅供參考，不能單獨作為確診或排除病例的依據(jù)，對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。
12.2已知NT-proBNP主要通過腎臟代謝，有腎病的患者可能會出現(xiàn)NT-proBNP升高的現(xiàn)象，需要進(jìn)行鑒別診斷。
12.3已知BNP及NT-proBNP參考值受到年齡因素的影響，對于老年人檢測時應(yīng)考慮年齡因素判定結(jié)果。
12.4患有急性心肌梗塞的病人、腎臟透析病人和已經(jīng)進(jìn)行過腎透析的病人的利鈉肽的濃度可能會升高。（NT-proBNP適用）。
12.5患者的樣本中可能含有異嗜性抗體，這些抗體會干擾免疫試驗，導(dǎo)致結(jié)果假性升高或下降。
12.6干擾物質(zhì)及鉤狀效應(yīng)（HOOK效應(yīng)，如適用）對檢測結(jié)果的影響。明確干擾物對測定的影響，同時列出干擾物的具體濃度，不應(yīng)使用模糊的描述方式。
13.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】詳述以下性能指標(biāo)：
至少應(yīng)包括：準(zhǔn)確度、檢出限、線性、重復(fù)性、批間差。
14.【注意事項】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：
14.1如使用冰箱中冷藏保存的檢測試劑建議檢測前應(yīng)從冰箱內(nèi)取出，放置到室溫再打開使用，否則會影響檢測結(jié)果。
14.2有關(guān)試驗操作、樣本保存及處理等其他注意事項。
14.3采用不同方法學(xué)的試劑檢測所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造成錯誤的醫(yī)學(xué)解釋，建議實驗室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測報告中注明所用試劑特征（如參考區(qū)間或方法學(xué)）。
14.4有關(guān)人源組分（如有）的警告，如：試劑內(nèi)質(zhì)控品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了HBsAg、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項目的檢測，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。提示對于潛在傳染源的處理方式。
14.5對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都視為傳染源進(jìn)行處理。
14.6對于動物源性組分，應(yīng)給出具有潛在感染性的警告。
三、審查關(guān)注點
（一）產(chǎn)品原料的選擇是影響最終產(chǎn)品的重要因素，腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑通常選用抗BNP/NT-proBNP單克隆或多克隆抗體建立起來的免疫學(xué)測定方法，應(yīng)重點關(guān)注抗體的制備工藝及純化方式。
（二）該產(chǎn)品暫無國家標(biāo)準(zhǔn)品，申請人可建立自己的企業(yè)參考品，參考品來源應(yīng)穩(wěn)定，并明確建立過程。其溯源性應(yīng)符合GB/T 21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求。
（三）生產(chǎn)工藝中包被液種類、包被濃度的選取，對產(chǎn)品的反應(yīng)強(qiáng)弱、本底值、基準(zhǔn)值、靈敏度、非特異性均會產(chǎn)生較大影響。在審評過程中應(yīng)對以上工藝重點關(guān)注。
（四）由于BNP影響因素較多，對環(huán)境溫度變化敏感，所選用的抗凝劑種類及采血管材質(zhì)會對其檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確度產(chǎn)生影響，建議使用塑料管作為血樣采集管，在審評過程中應(yīng)關(guān)注使用環(huán)境溫度、抗凝劑種類、采血管材質(zhì)等內(nèi)容。
（五）在交叉反應(yīng)物質(zhì)的選取過程中，應(yīng)考慮結(jié)構(gòu)類似物的干擾。
（六）有文獻(xiàn)顯示BNP在人體內(nèi)的半衰期為22分鐘，體外室溫下穩(wěn)定性為4小時，由于各企業(yè)的原料選擇、工藝過程的不同，BNP在體外室溫穩(wěn)定性也不盡相同，應(yīng)重點關(guān)注其樣本儲存、運輸?shù)姆€(wěn)定性，并在“樣本收集要求”中予以提示。
（七）BNP/NT-proBNP預(yù)期值呈現(xiàn)年齡、性別差異，在臨床評估試驗對試驗人群的選擇、參考區(qū)間的確立/驗證過程中應(yīng)予以體現(xiàn)。
（八）說明書中預(yù)期用途、儲存條件及有效期、檢驗方法、參考范圍、產(chǎn)品性能指標(biāo)、抗干擾能力等描述應(yīng)分別與臨床研究資料、穩(wěn)定性研究資料、參考區(qū)間研究資料、分析性能評估資料的研究結(jié)論相一致。
（九）審查產(chǎn)品技術(shù)要求時應(yīng)注意產(chǎn)品應(yīng)符合YY/T 1451—2016《腦利鈉肽和氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑（盒）（定量標(biāo)記免疫分析法）》有關(guān)規(guī)定。
（十）本指導(dǎo)原則中涉及的“室溫（常溫）”根據(jù)《中國藥典》2015年版的解釋，系指10℃—30℃，應(yīng)與申報資料中所涉及的驗證資料相關(guān)溫度內(nèi)容對應(yīng)。
四、名詞解釋
（一）準(zhǔn)確度（Accuracy）。一個測量值與可接受的參考值間的一致程度。
（二）分析特異性（Analytical Specificity）。測量程序只測量被測量物的能力。用于描述檢測程序在樣本中有其他物質(zhì)存在時只測量被測量物的能力。通常以一個被評估的潛在干擾物清單來描述，并給出在特定醫(yī)學(xué)相關(guān)濃度值水平的分析干擾程度（潛在干擾物包括干擾物和交叉反應(yīng)物）。
（三）線性（Linearity）。在給定測量范圍內(nèi)，給出的測量結(jié)果與樣本中實際存在的被測量物的值成比例的能力。線性是描述一個測量系統(tǒng)的測量示值或測量結(jié)果相關(guān)于樣本的賦值符合直線的屬性。
（四）精密度（Precision）。在規(guī)定條件下，相互獨立的測試結(jié)果之間的一致程度。精密度的程度是用統(tǒng)計學(xué)方法得到的測量不精密度的數(shù)字形式表示，如標(biāo)準(zhǔn)差（SD）和變異系數(shù)（CV）。
（五）檢出限。描述一個檢驗程序以特定置信水平能報告為存在的被測量最低值，它也被用來指最小可檢測濃度。（在給定聲稱物質(zhì)中存在某成分的誤判概率為α時，聲稱不存在該成分的誤判概率為β，IUPAC（國際理論化學(xué)與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會）建議α和β默認(rèn)值等于0.05）
（六）待評價系統(tǒng)。擬進(jìn)行性能評估的產(chǎn)品。
（七）待測物標(biāo)準(zhǔn)液。待測物與相應(yīng)的溶劑混合后制備的標(biāo)準(zhǔn)液。
（八）基礎(chǔ)樣本。樣本與相應(yīng)的溶劑混合制備成基礎(chǔ)樣本。
（九）待回收分析樣本。樣本與相應(yīng)的待測物標(biāo)準(zhǔn)液混合制備成待回收分析樣本。
五、編寫單位
天津市醫(yī)療器械技術(shù)審評中心。
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